实验原理在于利用脂类染料（如苏丹黑或油红O）对血清脂蛋白进行预染。随后，将预染的血清置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。通电后，脂蛋白朝向正极移动，形成多个分离区带。

试剂与器材

1. **巴比缓冲液**（pH 8.6，离子强度 0.075）：用于电极缓冲液，配方包括巴比/妥钠154g，巴比/妥276g，EDTA酸0.292g，溶解后加水至1000ml。
2. **三羟甲基/氨基甲/烷缓冲液**（pH 8.6）：用于凝胶缓冲液，包含三羟甲基/氨基甲/烷12.12g，EDTA酸0.29g，NaCl15.85g，溶解后加水至1000ml。
3. **琼脂糖凝胶**：琼脂糖0.45g，三羟甲基/氨基甲/烷缓冲液50ml，水50ml，加热沸腾直至琼脂糖完全溶解。
4. **挖槽工具**：制作切口刀和挖槽小匙。切口刀使用刀片及有机玻璃或木片固定；挖槽小匙由铜丝制成，锤成扁平状。
5. **电泳槽和电泳仪**：使用与血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳相同的仪器。

操作步骤

1. **预染血清**：在小试管中将血清0.2ml与苏丹黑染色液0.2ml混合，在37℃水浴中染色30分钟后，进行离心（2000转/分，约5分钟）。
2. **制备琼脂糖凝胶板**：将已配制的0.45%琼脂糖凝胶加热融化后，用吸管将凝胶溶液倒入载玻片，每片25ml，静置约半小时进行凝固，其间可放入冰箱加速。
3. **点加血清**：在已凝固的琼脂糖凝胶板上，切入约2cm深的槽，利用铜丝小匙取出长方小条凝胶。用滤纸吸干槽内水分，吸取预染的血清约15μl，注入小槽内。
4. **电泳**：将凝胶板平行放入电泳槽中，样品位于阴极端。两块三层纱布浸入巴比/妥缓冲液中，紧贴凝胶板两端，并确保纱布另一端浸入电泳槽中（注意不可用三羟甲烷缓冲液替代）。接通电源，设定电压为120-130V，每块电流为3-4mA。电泳约15至55分钟可观察到分离的色带。

注意事项

1. 电泳样品需为新鲜的空腹血清。
2. 每块凝胶可挖两条小槽，允许添加两个样品。
3. 可以使用与小槽等大小形状的有机玻璃片提前固定在琼脂糖凝胶上，凝固后去除该片，便于直接加样。
4. 为保留电泳样本，可将电泳后的凝胶板（连同玻片）浸泡于清水中2小时以脱盐，然后在烘箱中（约80℃）干燥。

结果及临床意义

1. 正常人血清的脂蛋白显示三条区带：由负极到正极依次为β-脂蛋白（最深）、前β-脂蛋白（最浅）和α-脂蛋白（中间浓度），在原点应无乳糜微粒。
2. 若前β-脂蛋白比α-脂蛋白更深，并结合血清甘油三酯明显升高且胆固醇正常或略高，则可诊断为Ⅳ型高脂蛋白血症。
3. 若β-脂蛋白明显深染，且血清总胆固醇显著增高，甘油三酯正常，则为Ⅱa型；若血清总胆固醇增高，而前β-脂蛋白稍溶者为Ⅱb型。
4. 如果β-和前β-两区带无法分离，整体称为“宽β区带”，此情况下血清甘油三酯和胆固醇均增高，则诊断为Ⅲ型。
5. 若原点出现乳糜微粒，β和前β均正常或减少，且结合血清甘油三酯显著升高，则诊断为Ⅰ型。

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